Inseminacion Artificial
Los primeros trabajos de inseminación artificial en cerdos fueron realizados en Rusia en la década del 30 sin embargo el uso de la inseminación artificial se ha generalizado en esta última década como consecuencia del desarrollo de programas de mejoramiento genético. Una manera barata y práctica de incorporar mejoramiento genético en las granjas es a través del uso de la IA. La potencia de la IA depende del la superioridad genética del macho y de la posibilidad de diseminar sus cualidades al mayor número de hembras para producir decendencias de mejor calidad genética. Tal vez la mayorventaja que ofrece la inseminación es que le permite mayor uso de nueva genética superior, a un costo potencialmente menor en relación a la monta natural y con menos riesgo de transmisión de enfermedades. Comprar el semen permite diversidad genética, que puede usarse para optimizar los sistemas de cruzamientos en las granjas más pequeñas y aumentar el progreso genético.
Además, los buenos verracos pueden usarse más que lo que se utilizan para monta natural porque con la IA se aumenta el número de servicios por eyaculado.
Una de las desventajas es que puede requerir un nivel de manejo más alto que en monta natural. En la inseminación artificial existe mayor oportunidad de que ocurran errores humanos que con la monta natural. Cuando un verraco monta a la hembra, el semen no está expuesto a grandes cambios ambientales, y generalmente es depositado en la hembra más de una vez, durante un período que comprende el momento óptimo para la fertilización. En contraste, es probable que mientras se colecta, diluye y transporte el semen ocurran cambios ambientales y que el momento en que se realice la siembra no sea elegido correctamente en relación al momento en que se produce la ovulación por ello para obtener una alta tasa de concepción y camadas numerosas, la detección del estro (chequeo del celo) debe ser hecho cuidadosamente y sin fallos.
La higiene del equipo es muy importante en todo el proceso de inseminación artificial. existen materiales desechables que evita la tarea de limpiar rigurosamente los equipos.
También se pueden enumerar otras ventajas de la IA:
�� Minimiza la transmisión de enfermedades reproductivas
�� Facilita el trabajo en bandas compactas
�� Utilización de padrillos genéticamente superiores pero con problemas en la MN
�� Disminuye el riesgo de los operarios (eliminación de padrillos muy agresivos)
�� Machos infértiles (mínima frecuencia) son rápidamente detectados (cuando no se utiliza pool)
�� Permite el cruzamiento entre animales alojados en distintas granjas
�� Elimina los problemas de apareamientos entre animales de distinto tamaño
�� Reduce los costos reproductivos (ahorro de espacio, comida y trabajo)
�� Reduce del número de espermatozoides por servicio sin comprometer la tasa
reproductiva
Todo el procedimiento de IA en cerdos comprende:
�� la selección y evaluación de los machos,
�� la recolección y evaluación del semen,
�� el procesamiento y almacenaje,
�� la detección del estro,
�� la técnica de siembra,
�� la evaluación de los resultados reproductivos obtenidos.
1- Extracción y recolección de semen
Lugar de extracción Debe ser amplio, limpio y que permita la circulación del macho alrededor del potro de salto o maniquí, debe ubicarse junto a los boxes donde se alojan los verracos.
Es importante que el suelo sea correcto (ni excesivamente liso ni muy áspero) para que el verraco pueda sostenerse bien sobre sus patas.
1- Potro : Conviene que sea sólido y esté fijado al suelo para poder resistir el peso del verraco y los golpes que éste da durante la fase de excitación.
Es preferible que sea regulable principalmente en altura y con acceso fácil para tomar el prepucio sin tener contacto con una parte del potro.
2- Guantes: sin talco ni productos químicos, pueden tener efecto espermicida.
3-Recipiente para recolección: Puede utilizarse un recipiente de plástico graduado limpio y esterilizado dentro de una caja de telgopor o bien utilizar un termo o un recipiente de vidrio (vaso de precipitado) con bolsa descartable.
4- Gasa o filtro de papel: si se filtra el eyaculado durante la recolección para evitar la aglutinación de los espermatozoides. El filtrado puede realizarse también en el laboratorio.
Una vez que el macho salta sobre el potro con manifestaciones idénticas a las de la monta natural el pene es fijado con la mano cubierta con un guante de látex ejerciendo ligera presión.
Local de extracción
Durante la recolección pueden diferenciarse bien tres fracciones: la primera se descarta está contaminada con orina, contiene la secreción de las glándulas y escasos espermatozoides.
La segunda fracción de aspecto blanco lechoso rica en espermatozoides es la que interesa diluir; la tercera comúnmente denominada por su consistencia gelatinosa „granos de tapioca‰ debe ser descartada. La recolección se realiza en frascos de boca ancha previamente calentados a 32 ÀC para evitar el shock
térmico, provistos de gasa en el extremo para filtrar los granos de tapioca y luego mantenidos en caja de telgopor para evitar cambios bruscos de temperatura y al abrigo de la luz .El tiempo que media entre la extracción y el procesamiento en el laboratorio no debe exceder las dos horas.
En términos generales los machos serán utilizados a partir de los 10 meses de edad con una frecuencia de dos veces por semana.
2- Examinación y dilución
En el laboratorio el semen es sometido a controles para determinar la calidad.
Su poder fecundante dependerá de:
�� Color: varía de gris a crema según la concentración espermática. Trazas rojas o marrones indican contaminación con sangre o pus.
�� Olor: si es muy fuerte indica contaminación con orina, secreciones prepuciales o contaminación bacteriana.
�� Motilidad: Se coloca una gota de semen sobre platina caliente a 37 ÀC al microscopio óptico y se califica en forma semicuantitativa en escala 0 a 5 (0:no
motilidad, 5: 100% de motilidad)
�� Concentración: con colorímetro o cámara hemocitométrica como se cuentan los glóbulos blancos.
La concentración de espermatozoides varía entre 0.1 y 1 x 109espermatozoides por cm3. solo serán utilizados aquellos machos que exhiban concentraciones mayores a 0.2 x 109 /cm3.
�� Morfología: Se utilizan diferentes técnicas de tinción, las más usadas son las de Violeta de metilo y Eosina-nigrosina y de fluorescencia.
Morfología normal (Eosina-Nigrosina) Espermatozoides con técnicas de fluorescencia
Entre los defectos más frecuentes se pueden observar: espermatozoides sin colas, aglutinados, cabezas dobles, colas enroscadas y gotas protoplasmáticas en el cuello.
Espermatozoides aglutinados
La observación morfológica del eyaculado y la determinación de la concentración se realiza cada vez que el macho ingresa al centro de IA y periódicamente. El color, olor y la motilidad se controlan en cada extracción.
Realizados los controles de calidad el semen es diluido para mayor aprovechamiento y mantenimiento del poder fecundante. Existe gran variedad de diluyentes para ser utilizados en cerdos. La característica común es que contienen glucosa como fuente de energía.
El diluyente debe Conservar el poder fecundante de los espermatozoides, mantener la integridad de las estructuras celulares y proveer la energía necesaria para el metabolismo de las células.
La dilución del eyaculado dependerá de la concentración y el volumen del mismo, sin embargo se aconseja no realizar diluciones mayores de 1:8/10 para que la presión osmótica del diluyente no altere las membranas celulares. El diluyente se coloca en frascos de Erlenmeyer dentro de un baño térmico a 37ÀC durante 20 minutos, en el mismo frasco puede verterse la cantidad de semen de acuerdo a la dilución mezclando suavemente con varilla de vidrio. Luego el semen diluido es trasvasado a los frascos de inseminación. Otra forma es depositar el diluyente y luego el semen en los frascos con pipeta.
Cuando se realizan dosis heterospérmicas se procede a la dilución previa de los eyaculados, mezclar al 1:10 teniendo el medio de conservación 200 mg de gentamicina/litro. Se mantiene 1/2 hora a temperatura ambiente y posteriormente se realiza la mezcla de los eyaculados prediluidos.
Los frascos contendrán una dosis de 75 - 100cc de semen diluido con una concentración mínima de 1.5 x 109 espermatozoides.
Conservación
Los frascos descartables estarán bien cerrados, identificados con el RP del animal, raza y fecha de extracción. Serán conservados entre 15 y 18ÀC y al abrigo de la luz.
Dependiendo del diluyente utilizado la duración será de 72 hs a 5-7 días.
3- Técnica de inseminacion
Detección del celo.
Es fundamental depositar el semen en el tracto genital femenino en el momento correcto en relación a la ovulación.
Vulva edematizada y enrojecida (4 días aprox.)
Reflejo de inmovilidad ante el macho (2,5 días aprox.)
48 36 24 12 0 12 24 36 48 60 Horas
Momento optimo
Ovulación
Pico de fertilidad
Curva de fertilidad
Cuando se detecta el celo dos veces al día (mañana y tarde):
El momento óptimo para inseminar depende del momento de
detección del celo.
Reflejo de Inmovilización Primera inseminación Segunda inseminación
A la mañana tarde 1er. día mañana 2do. día
A la tarde mañana 2do. día tarde 2do. día
Recuerde:
�� No inseminar inmediatamente cuando aparece el reflejo de inmovilización
�� Espere 8 a 12 hs luego del comenzado el reflejo de inmovilización
�� Insemine por segunda vez 8 a 12 hs luego de la primera
inseminación
La inseminacion se realiza con cateteres de Melrose que es de goma o desechables
de plástico de las que existen varios modelos.
Materiales de inseminacion
Cateter desechable para inseminacion convencional
Es recomendable evaluar el estado de las dosis del semen con un microscopio antes de sembrarlo.
La técnica de inseminacion es extremadamente sencilla. Es conveniente que la hembra en celo tenga contacto visual con el verraco para que se produzca la cadena de reflejos que acontecen en la monta natural. El operador presiona la grupa para que se manifieste el reflejo de inmovilización que caracteriza la cerda en celo. Toma la dosis de semen a utilizar de la heladera o caja de telgopor y la guarda en el bolsillo al abrigo de la luz. Limpia los labios de la vulva con papel o gasa estéril y agua, retira la dois del bolsilo y la agita suavemente lubrica el extremo de la pipeta con unas gotas de semen e introduce la misma dirigiéndola hacia la columna vertebral.
El cateter se desplaza suavemente hacia arriba y adelantehasta que toca el cervix uterino, momento en que debe ser rotada en sentido contrario a las agujas del reloj para que el extremo de la misma quede trabado en los pliegues del cuello uterino.
Se acopla el frasco al extremo libre introduciendo lentamente el contenido del mismo.
En las cerdas destetads el semen desciende por gravedad, en las cachorras es necesario aplicar una ligera presión. Lo ideal es que la inseminación dure entre 4 y 5 minutos.
Vaciado el frasco y sin introducir aire, el mismo se desacopla y se gira la pipeta en el mismo sentido que las agujas del reloj retirando la pipeta suavemente.
Cuando se comparan resultados obtenidos en porcentaje de preñez y tamaño de camada, existen marcadas diferencia entre granjas, que probablemente se encuentren asociadas a factores de los cuales los mas frecuentes son el nivel sanitario y errores humanos (entrenamiento, registro de datos, dedicación) etc.
Cuando se evalúan los datos en primerizas y cerdas adultas los resultados son inferiores en primerizas, lo mismo ocurre cuando las cerdas son apareadas con verracos jovenes.
Para construir un laboratorio de Inseminación Artificial hay que tener en cuenta que como indispensable se va a necesitar:
* Estufa o conservadora de 15º C
* Baño maria
* Vaso de precipitado de 250 cc
* Matraces de 2000 ml o Elemmeyer
* Gasas o papel de filtro
* Botellita de inseminacion
* Cateteres desechables
* Termo de recogida de semen
* Diluyentes de semne (corta y larga conservacion)
* Microscopio
* Camara de Buker (para conteo de espermatozoide)
Cuando ya estén reunido este instrumental de trabajo, tendrá que enfrentar la recolección de semen del verraco
El trabajo de recolección empieza en edad temprana, ya que se requiere entrenar a los padrillos en un potro o maniquí para realizar la extracción.
Un verraco se puede entrenar a partir de los 6 o 7 meses de edad y los verracos adultos de monta natural pueden aprender. El ritmo de recogida puede ser de tres veces cada dos semanas. La sala de recolección debe ser un lugar limpio, fácil de higienizar, el piso no puede ser muy resbaladizo.
Todos los materiales que tienen contacto con el semen tienen que ser atemperados a 37 ºC, limpios y esterilizados.
Cuando el animal esta sobre el potro, se debe vaciar el prepucio para eliminar restos de orina. Cuando extrae el pene se trata de fijar el glande, sin ejercer una gran presión y traccionandolo para lograr su total amplexación.
El eyaculado se recibe en el vaso de precipitado con una gasa en la boca del mismo, que permite durante la recolección dividir la fracción espermática de gel o tapioca.
Una vez recogido el semen se debe llevar al laboratorio para su procesado.
Dentro del laboratorio el semen es expuesto a controles obligatorio los cuales son:
* Volumen de fraccion rica: Varía según edad, tamaño testicular, raza, estado fisiológico, etc. entre 50 y 200 cc.
* Coloracion del eyaculado: Blanco cremoso normal.
* Motilidad: Se aprecia colocando una gota de semen sobre el portaobjeto, dándole una puntuación, según el movimiento, de 0-5.
Recogida semen
Es importante también apreciar detenidamente las morfoanomalias espermáticas que se puedan llegar a presentar.
Motilidad
Cuando el semen ya se haya analizado y punteado se procede a la preparación de las dosis seminales.
Las dosis para inseminar a las cerdas se preparan en agua bidestilada a 37 ºC, mezclando el diluyente un sobre por litro.
Cuando se va mezclando el semen extraído, se calcula una concentración espermática de 3 x 1.000.000.000 espermatozoides.
Preparacion dosis
El volumen de la dosis final que se aplicara será de entre 80 y 100 cc.
Si se debe conservar hay que dejar que la temperatura disminuya gradualmente, ya que si no tendremos muerte de espermatozoides y la dosis de semen no tendrá la misma efectividad.
Ahora que la dosis ya está preparada y lista para guardar o utilizar debemos detectar el celo en la cerda a inseminar. Este es uno de los factores más importantes para el éxito de la inseminación.
Se puede dar cuenta del celo cuando hay algunos de estos signos “externos
* Edema o epiremia vulvar
* Actitud inquieta
* Gruñidos caracteristicos
También se presentan el siguiente comportamiento “sexual”
* Busqueda incesante del verraco
* Monta de otras hembras
* Reflejo de inmovilizacion
Para estimular estos signos se puede pasar un verraco o padrillo de retajo para que la hembra lo olfatee, siempre con una separación de por medio. El operario puede ayudar haciendo presión en zona lumbar.
Es conveniente realizar la detección dos veces al día, siendo a las 7 hs. Y a las 17 hs. Los horarios óptimos, por la disponibilidad de luz solar.
Las cerdas adultas se inseminan 24 horas después de presentar quietud de monta, mientras que las cachorras deben inseminarse 12 horas después dado que el celo es de menor duración.
Si ya detectaron el celo es hora de inseminar, introduciendo el catéter por el “techo” de la vagina, para evita la plica uretral, una vez salvada la plica, se introduce llegando hasta los anillos del cuello del útero y girando hacia la izquierda quedando el catéter fijo en el cuello, lo que comprobamos tirando ligeramente hacia afuera.
Posteriormente se introduce la dosis seminal, debiendo tardar por lo menos 5 minutos en “descargar” completamente la dosis. Hasta aquí si no se ha presentado ningún problema, haz hecho las cosas de forma perfecta… Mejor imposible!